Täname, et külastasite veebilehte Nature.com.Teie kasutataval brauseri versioonil on piiratud CSS-i tugi.Parima kasutuskogemuse saamiseks soovitame kasutada uuendatud brauserit (või keelata Internet Exploreris ühilduvusrežiim).Seni renderdame saidi jätkuva toe tagamiseks ilma stiilide ja JavaScriptita.
Traumajärgset stressihäiret (PTSD) iseloomustab kahjustus võimes neutraliseerida hirmureaktsioone traumaga seotud vihjetele.Inimeste ja loomade uuringud osutavad erinevustele eesmise ajukoore teatud piirkondade kui peamiste vahendajate osaluses, mis määravad hirmu mahasurumise edukuse, kuid nende piirkondade erinevat kaasatust määravate närviahelate koosmõju pole selge.Et paremini mõista, kuidas individuaalsed erinevused väljasuremise tagasikutsumises peegelduvad neuronaalse ahela aktiivsuse erinevustes, märgistasime roti sublimbilise ajukoore (IL) projektsioonid retrograadsete märgistusainetega ja võrreldi neuronite projektsioone IL-projektsiooni neuronite sees ja väljaspool.Analüüsisime neid andmeid, rühmitades need vastavalt rottide tuhmunud mälu säilivusastmele.Leidsime, et IL-i projitseerivates rakkudes näitasid tagumise paratalamuse neuronid rottidel suurenenud aktiivsust, millel oli hea väljasuremise meeldetuletus.Lisaks IL-i projitseerivatele rakkudele täheldati Fos aktiivsuse suurenemist hea eraldusvõimega valitud piirkondades roti claustrumis ja ventraalses hipokampuses.Meie tulemused näitavad, et väljasuremise tagasikutsumise erinevused on seotud närvitegevuse spetsiifiliste mustritega IL-projektsioonide sees ja väljaspool.
Hirmu konditsioneerimine tekib siis, kui neutraalne stiimul on seotud aversiivse tingimusteta stiimuliga (UCS), nii et algselt neutraalne stiimul, nüüd konditsioneeritud stiimul (CS), kutsub UCS-i puudumisel esile konditsioneeritud hirmureaktsiooni (CR).Konditsioneeritud hirmu ümberpööramine oli tingitud CR-i vähenemisest CS-i korduva CS-i esitamise tõttu UCS1 puudumisel.Varasemad uuringud on näidanud, et posttraumaatiline stressihäire (PTSD) on seotud võimetusega meeles pidada tingitud hirmureaktsioonide väljasuremist2.Kognitiiv-käitumisteraapia nurgakiviks posttraumaatilise stressihäire ravis on kokkupuuteteraapia, mis põhineb õpitud hirmureaktsioonide väljasuremisel3,4.Seetõttu võivad näriliste väljasuremishirmu ja selle aluseks olevate närvimehhanismide individuaalsete erinevuste uuringud aidata selgitada inimeste reaktsioonide erinevusi traumadele ja traumajärgse stressihäire ravile.Vaatamata edusammudele neuraalsete mehhanismide tuvastamisel, mis eristavad edukaid ja ebaõnnestunud väljasuremismälestusi, on veel palju avastada.
Näriliste mudelid on selles töös kasulikud, kuna näriliste väljasuremise mäletamisel on olulisi individuaalseid erinevusi7,8,9,10.Varasemad tööd, mis uurisid hirmu väljasuremise neuraalseid mehhanisme populatsiooni tasandil, on näidanud, et väljasuremise meeldetuletamiseks on vajalik infralibilise ajukoore (IL) aktiveerimine (viited 11, 12, 13, kuid vt 14), ja mõned uuringud on näidanud, et väljasuremine on vähenenud. näriliste aktiivsus IL-is, millel on halb mälu väljasuremise kohta võrreldes närilistega, keda kardetakse.Siiski on ebaselged mehhanismid, mille abil IL-id närilistel hirmu kõrvaldamise hõlbustamisse erinevalt kaasatakse, võrreldes nendega, mille väljasuremine on nõrgem.
Üks võimalus on see, et üksikisikutevahelised erinevused hirmu väljasuremise mälus on spetsiifiliste aferentsete IL-de erineva aktiveerimise tulemus.Anatoomilised uuringud18 on näidanud, et aju mitmesugused kortikaalsed ja subkortikaalsed piirkonnad saadavad IL-le tihedaid projektsioone, mis omakorda saadavad eferentseid projektsioone paljudesse ajupiirkondadesse.Populatsioonitaseme uuringud on näidanud, et IL-i projektsioonid mandelkehasse on olulised hirmu väljasuremise saavutamiseks20, 21,22 ja IL-i sisend basolateraalsest mandelkehast (BLA) on samuti seotud väljasuremise õppimisega.Vähem on uuritud IL-kesksete ahelate kaasamist väljasuremise meenutamisse, kuigi hiljutised tööd näitavad, et nii ventraalne kui ka dorsaalne hipokampus on seotud IL-i prognoosimisega.Ilmselt osalevad hirmu väljasuremise mälus ka IL-i eferentsed projektsioonid taalamuse rekombineerivasse tuuma.
Need varasemad uuringud hakkavad maalima pilti väljasuremise meeldetuletamisega seotud närviahelate interaktsioonist, kuid on väga vähe andmeid selle kohta, kas IL-kesksete närviahelate aktiivsus mõjutab individuaalseid erinevusi väljasuremise meenutamisel.Siin püüdsime kindlaks teha, kas erinevused hirmu väljasuremise mälus üksikisikute vahel on seotud muutustega IL-i sisendi aktiveerimises konkreetsetes ajupiirkondades.Eelkõige hindasime IL-i aferentsete rakkude aktivatsiooni talamuse (PVT), rangluu (CLA), BLA ja ventraalse hipokampuse (vHPC) paraventrikulaarses tuumas.Need ajupiirkonnad valiti nii seetõttu, et nad saadavad IL-le tihedaid projektsioone, kui ka seetõttu, et on põhjust kahtlustada, et need võivad olla seotud hirmu väljasuremise väljendamisega 18 .Näiteks hiljutine uuring näitas, et väljasuremise paljunemiseks on vaja PVT-d, piirkonda, mis on teadaolevalt seotud hirmu omandamise ja paljunemisega.Lisaks on varasemad uuringud näidanud suurenenud basaal-amügdala ja vHPC aktiivsust rottidel, kes ekspresseerivad ekstinktsioonimälu.Lõpuks on klausli analüüs rohkem uurimuslik, kuna ükski eelmine töö ei ole hinnanud selle rolli väljasuremisel.Hiljutised tööd viitavad aga sellele, et see mängib rolli hirmu kontekstuaalses tingimises29.
Viiruslikud GFP-ga konjugeeritud retrograadsed märgistajad süstiti rottide IL-i enne käitumistesti ja Fos aktiivsust IL-i aferentides mõõdeti väljasuremise taasesituse, hirmu meenutamise ajal ja rottidel, kellele ei tehtud käitumisteste.Meie tulemused näitavad, et projektsioonid tagumisest paraventrikulaarsest talamusest IL-i näitavad suurenenud aktiivsust rottidel, kes meenutavad edukalt väljasuremist.Lisaks IL-i prognoosidele suurenes hästi taandunud rottidel neuraalne aktiivsus rangluu ja ventraalse hipokampuse teatud piirkondades.Meie tulemused näitavad, et IL-le projitseeritud sisemise ja välise närvitegevuse mustrid on seotud individuaalsete erinevustega hirmu väljasuremise mälus.
Katsealustena kasutati 54 täiskasvanud isast Sprague-Dawley rotti (300-325 g saabumisel), mis olid saadud ettevõttest Charles River Laboratories (Raleigh, NC).Rotte majutati paarikaupa, vaba juurdepääsu toidule ja veele, 12-tunnise valguse/pimeduse tsüklis (tuled põlevad kell 7 hommikul).Nendes katsetes kasutati kahte rühma rotte (n = 28 ja n = 26).Pärast surma, kirurgilise vea, GFP ekspressiooni puudumise sihtkohas, halva koe kvaliteedi ja käitumisprobleemide väljajätmist (selgitatud jaotises Meetodid) hõlmas väljasuremise tagasikutsumise rühm 21 rotti ja hirmu meenutamise rühm 7 rotti, maja puurid.rühm koosnes 7 rotist (lõppanalüüsi kaasati 35 rotti).Kõik protseduurid kiitis heaks Stony Brooki ülikooli institutsionaalne loomade hooldamise ja kasutamise komitee ning need olid kooskõlas ARRIVE juhistega (https://arriveguidelines.org) ja NIH laboriloomade hooldamise ja kasutamise juhistega.
Rotte raviti kaks päeva enne operatsiooni.Rotid anesteseeriti ketamiini (87 mg/kg) ja ksülasiiniga (10 mg/kg), pandi stereotaksilisse aparaati (Stoelting, Woodale, IL) ja neile süstiti ühepoolselt AAVrg-CAG-GFP (Addgene, 30) IL-i.(tasakaalu vasak ja parem süstimine).Süstimiseks langetati oma kohale 22-mõõtmeline kanüül (AP: + 3,00, ML: ± 0,6, DV: – 5,2).Sisestage 28G sisemine kanüül (ühendatud infusioonipumbaga PE 20 torustiku kaudu) juhtkanüüli, et väljastada 0,6 µl viirust kiirusega 0,15 µl minutis, ja jätke paigale 5 minutiks pärast infusiooni puutumatust..Pärast õmblemist süstiti rottidele meloksikaami (1 mg/kg) ja niipea, kui nad said liikuda, viidi nad tagasi oma puuridesse.Rotte hoiti puurides umbes 7 nädalat, et võimaldada viiruse taastumist ja retrograadset transporti.Kolm rotti surid anesteesia all, mille tulemusena paranes operatsioonist edukalt 51 rotti (94%).
Kõik protseduurid viidi läbi 32 cm × 25 cm × 21 cm konditsioneerimiskambrites (Clever Systems Inc., Reston, VA), mis paiknesid 45,7 cm × 43,2 cm × 43,2 cm heli neelavates isolatsioonikastides (Clever Sys. . Inc.).).Väljasuremise õppimise ja väljasuremise tagasikutsumise seansside ajal muudeti konteksti algsest tingimuslikust kontekstist erinevaks.Tingimus A (hirmu genereerimine) hõlmas 28-voldist hõõglampe (Chicago Micro Lighting, Ühendkuningriik), tingimus B (kustutamise koolitus, väljasuremise tagasikutsumise test ja hirmu meenutamise test) aga infrapuna LED-lampe (Univivi IR Illuminator, Shenzhen). ., Hiina;U48R).Lisaks, kui Context A-l on vibratsioonivastane restpõrand roostevabast terasest ja pleksiklaasist seintega, siis Context B-l on põrandale ja seintele asetatud värvitud metallist sisetükid.Konteksti B kuju muudeti ka, asetades standardsesse konditsioneerimiskambrisse 33,5 cm x 21,3 cm kõvera metallist sisetüki.Lisaks pühiti kontekstis A kambreid 5% äädikhappega, samas kui kontekstis B pühiti kambreid 5% ammooniumhüdroksiidiga.Lõpuks toodi B kontekstis rotid katseruumi ämbrites, mitte ei veeretatud vankrites puurides.Käitumisseansid salvestati ülemise kaameraga ja iga kaamera videosignaal suunati tarkvarasse (FreezeScan 2.00, Clever Sys. Inc., Reston, VA), mis hindas tuhmumiskäitumist pikslite muutuste põhjal.Parameetrid valiti nii, et arvuti poolt hinnatud tuhmumise käitumine vastaks täpselt käsitsi hinnatud koolitatud vaatlejate käitumisele.Väärtus, mis näitab 30-sekundilise intervalliga kokku keritud külmumisaja protsenti.
Kõik käitumisprogrammid viiakse läbi valguse/pimeduse tsükli valguse osa ajal.Rotte raviti 5 päeva enne käitumisprotseduuride algust ja transporditi kolmeks viimaseks ravipäevaks käitumistuppa.Käitumistesti esimesel päeval paigutati rühm väljasuremist meenutavaid rotte hirmust tingitud refleksi, seejärel paigutati konteksti A, anti 6-minutiline stimuleerimata aklimatiseerumisperiood ja seejärel mõlema kombinatsiooniga 4 kHz, 76 dB, 30 sekundit. .toon ja üldine lõpetamine, 1,0 mA, löök 1 s (2 min ITI).Kõigi käitumistreeningu jaoks viidi rotid tagasi puuridesse 2 minutit pärast viimast stiimuli esitamist.Järgmisel päeval paigutati väljasuremise ja tagasikutsumise rühma rotid kontekstiruumi B ja tegid pärast 6-minutilist harjumisperioodi väljasuremiskoolitusena 20 heliesitlust (2 min ITI).Järgmisel päeval eksponeeriti väljasuremisrühma rotid ekstinktsioonikatsena kontekstis B pärast 6-minutilist aklimatiseerumisperioodi 4 tooniga.Väljasuremismälu rühma rotte perfundeeriti 60 minutit pärast käitumisseanssi.Kontrollrottide rühmale, kes kutsusid esile hirmumälestused, tehti sama protseduur hirmuga seotud reaktsiooni esimesel päeval kontekstis A. Nelikümmend kaheksa tundi hiljem paigutati rotid kontekstiruumi B ja neile tehti 4 heliesitlust (2- minuti ITI) tagasikutsumise testina.hirm pärast 6-minutilist aklimatiseerumisperioodi.Rotte perfundeeriti 60 minutit pärast käitumisseanssi.Rühm koduseid kontrollrotte jäi kogu katse vältel oma kodupuuridesse ja neid perfundeeriti samal päeval kui katserotte.Kumbki kahest rotirühmast jagati kahte seeriasse ja loomade arv igas rühmas tasakaalustati seeriate vahel.Üks hirmumälestuste rühma kuuluv rott jäeti analüüsist välja, kuna tal ei ilmnenud hirmu konditsioneerimise märke (hirmumälestuste testi ajal külmus vähem kui 15% juhtudest).Käitumise ajaskaala diagrammi leiate jooniselt 2A.
Rottidele tehti üleannustamine Fatal Plusi lahusega (100 mg/kg), seejärel perfundeeriti jääkülma 10% PBS-iga ja seejärel 10% puhverdatud formaliiniga.Aju eemaldati ja seda hoiti 30% sahharoosi lahuses formaliinis temperatuuril 4 °C umbes 1 nädal.Seejärel aju külmutati ja lõigati 40 µm paksuseks krüostaadiks.Sektsioone säilitati järjestikku 10% PBS-is temperatuuril 4 °C.Seejärel viidi läbi immunofluorestsents huvipakkuvat ajupiirkonda sisaldavatel vabalt ujuvatel lõikudel.Sektsioone pesti kolm korda 10% PBS-s 5 minutit.Seejärel inkubeeriti sektsioone 2 tundi toatemperatuuril kitse normaalse seerumi 5% blokeerivas lahuses ja seejärel pesti veel kolm korda 5 minutit 10% PBS-s.Seejärel inkubeeriti sektsioone üleöö 4 °C juures primaarsetes antikehades (c-Fos, #2250, 1:500) (Cell Signaling, Danvers, MA), mis oli lahjendatud 1% BSA-s 10% PBS-is.Järgmisel päeval pesti sektsioone 10% PBS-s 30 minutit temperatuuril 4 °C, seejärel 3 korda 5 minutit 10% PBS-is ja inkubeeriti sekundaarse antikehaga (Alexa Fluor 594 kitse küülikuvastane, punane konjugaat, 1:500 ).) (Invitrogen, Carlsbad, CA) toatemperatuuril 2 tundi.Pärast 3 täiendavat pesemist 10% PBS-s 5 minutit, asetati lõigud klaasalustele ja suleti Fluoromount-G-ga (Invitrogen).Vaadake immunovärvimise representatiivseid pilte joonisel 3G.
Igast huvipakkuvast ajupiirkonnast kujutiste saamiseks kasutati fluorestsentsmikroskoopi, milles kasutati Infinity3 digikaamerat (Lumenera, Ottawa, Ontario, Kanada) ja valgusmootorit (Lumencor, Beaverton, OR), mis oli ühendatud Zeissi mikroskoobiga. IL ilma immunofluorestsentsita.Süstekoha õige paigutuse kinnitamiseks.Rakkude loendamiseks kasutatud pildid saadi 20-kordse suurendusega.Tehke iga koelõike jaoks üks pilt filtriga, mis võimaldab GFP visualiseerimist, ja üks pilt filtriga, mis võimaldab visualiseerida Alexa Fluor punase konjugaati sekundaarses antikehas, ning kujutise jaoks kasutati pilditarkvara (Infinity Analyze, versioon 3). ülekate.Saate hankida kõik kujutised kõigist ajupiirkondadest, kasutades sama säritusaega ja võimendusseadeid.Kuus rotti jäeti analüüsist välja, kuna viiruse peamine ülekandumine toimus väljaspool IL-i (tabamusmäär 88%).Veel kaheksa rotti jäeti välja, kuna vaatamata IL-i ründavale viirusele ei ilmnenud neil piisavat GFP ekspressiooni kõigis huvipakkuvates sihtaju piirkondades.Lisaks jäeti üks rott välja halva koekvaliteedi tõttu.
Pildi J (NIH) taustamüra vähendamiseks reguleerige heledust ja kontrasti, kasutades iga pildi puhul sama protseduuri.Retrograadsete märgistatud rakkude, Fos-märgistatud rakkude ja topeltmärgistatud rakkude koguarvu rakkude loendus teostas käsitsi katse läbiviija, kes loomi ei tuvastanud, kasutades Image J tsütomeetri pistikprogrammi.Rakkude arv normaliseeriti rakkudele/mm2.Fos ekspressiooni analüüsimiseks IL-i projitseerivates rakkudes normaliseeriti topeltmärgistatud rakkude arv retrograadselt märgistatud rakkude koguarvuga.MBLA, mvHPC ja pvHPC analüüsi jaoks liideti mitme 20x kujutise rakkude arv ja normaliseeriti rakkudele/mm2.Ülejäänud ajupiirkondade analüüsimiseks analüüsiti 20x kujutist või osa 20x kujutisest ja normaliseeriti rakkudele/mm2.vHPC analüüs hõlmas CA1, CA2 ja subdominantseid vHPC piirkondi.Joonisel 1 on kujutatud ajupiirkondi, mida on analüüsitud piltidega, mis tähistavad tasapinna eesmist-tagumist piiri.
Huvipakkuvate ajupiirkondade lühendid ja asukoht.Käsikirjas toodud lühendite ja ajupiirkondade asukohtade selgitus.Avalik ajukaart pärit Swansonilt (2004) Ajukaart: Rotiaju struktuur, 3. väljaanne, litsentsitud Creative Commonsi Attribution-NonCommercial 4.0 rahvusvahelise litsentsi alusel (https://creativecommons.org/licenses/by-nc/ 4.0) ./), allalaadimiseks saadaval aadressil https://larrywswanson.com.
Külmutamisaja protsent on keskmistatud 30-sekundilise helina taasesituse perioodi kohta, välja arvatud vahepealsed intervallid.Väljasuremise tagasikutsumise määrad arvutati, väljendades tuhmumisaja protsenti väljasuremise tagasikutsumise ajal tuhmumise protsendina esimese 4 väljasuremisharjutuse katse ajal (hajumine nelja väljasuremise tagasikutsumise tooni ajal / tuhmumine esimese nelja väljasuremise treeningtooni ajal * 100).Madalad skoorid näitavad head tuhmumismälu ja kõrged skoorid näitavad halba tuhmumismälu.Rotid sorteeriti väljasuremise tagasikutsumise skoori järgi, kusjuures väljasuremise tagasikutsumise skoori ülemises kolmandikus olevad rotid liigitati kui "halvad väljasuremise rotid" ja rotid, kes olid väljasuremise tagasikutsumise skoori viimase kahe kolmandiku skooris, liigitati "headeks".Mälu tuhmuvad rotid.
Kasutatakse mitteparameetrilisi teste, kuna andmed rikuvad sageli normaaljaotuse ja/või dispersioonide homogeensuse eeldusi.Spearmani auaste korrelatsiooni kasutati selleks, et teha kindlaks, kas ekstinktsiooni meenutamise skooride ja Fos-markerite ja kahekordsete markerite vahel on huvipakkuvates ajupiirkondades kõigil rottidel, kellele tehti ekstinktsiooni meenutamise testi.Mann-Whitney U-testi kasutati, et teha kindlaks, kas kahe sõltumatu rühma vahel oli erinevus.Kruskal-Wallise testi kasutatakse selleks, et teha kindlaks, kas 2 või enam rühma erinevad üksteisest, ja Dunni mitmekordse võrdluse testi kasutatakse siis, kui Kruskal-Wallise statistika on oluline.Väljasuremise õppimise ajal hääbumist hinnati korduvate mõõtmiste dispersioonanalüüsi abil, kus rühm oli subjektidevaheline tegur ja test subjektisisese tegurina. Tulemusi peeti kõigi statistiliste testide puhul olulisteks, kui p < 0,05. Tulemusi peeti kõigi statistiliste testide puhul olulisteks, kui p < 0,05. Результаты считались значимыми при p < 0,05 для всех статистических тестов. Tulemusi peeti kõigi statistiliste testide puhul oluliseks, kui p < 0,05.当所有统计检验的p < 0,05 时，结果被认为是显着的.当所有统计检验的p < 0,05 时，结果被认为是显着的. Результаты считались значимыми при p < 0,05 для всех статистических тестов. Tulemusi peeti kõigi statistiliste testide puhul oluliseks, kui p < 0,05.
Joonisel fig 2 on näidatud kõigi väljasuremisele kuuluvate rottide eksperimentaalne ajaskaala (joonis 2A) ja sagedusjaotus (joonis 2B). Hea ja halva väljasuremise rühmade rotid erinesid nendes arvutatud väljasuremise meeldetuletusskoorides oluliselt (U = 0, p < 0,001) (joonis 2C). Hea ja halva väljasuremise rühmade rotid erinesid nendes arvutatud väljasuremise meeldetuletusskoorides oluliselt (U = 0, p < 0,001) (joonis 2C). Крысы в ​​группах с хорошим и плохим угашением значительно различались по этим рассчитанным рассчитанным рассчитанным рассчитанным порошим U = 0, p <0,001) (рис. 2C). Hea ja halva väljasuremise rühma rotid erinesid oluliselt nende arvutatud väljasuremise tagasikutsumise määrade osas (U=0, p<0,001) (joonis 2C).在这些计算的灭绝回忆分数中，良好和不良灭绝组中的大鼠存在显着差，在显着差， 00 2C). U = 0, p < 0,001 (图2C， К ь (U = 0, p <0,001) (рис. 2C). Nendes arvutatud väljasuremise tagasikutsumise määrades erinesid hea ja halva väljasuremise rühma rotid oluliselt (U = 0, p < 0,001) (joonis 2C).Hea väljasuremise, halva väljasuremise ja hirmu meeldejäämisega rühmade vahel ei olnud külmumisajas olulist erinevust hirmust tingitud refleksi seansi baasperioodil (X2(2) = 2,746, p = 0,253) (joonis 2D).Lisaks ei olnud hirmust tingitud refleksi esimese tooni esitlemisel olulist erinevust külmumisajas hea väljasuremise, halva väljasuremise ja hirmu meeldejäämisega rühmade vahel (X2(2) = 1,107, p = 0,575), kuna samuti hirmu ajal teiste toonide ajal.Konditsioneerimise seansi ajal oli hea väljasuremise, halva väljasuremise ja hirmu meeldejäämisega rühmade vahel külmumisajas märkimisväärne erinevus (X2(2) = 2,214, p = 0,331) (joonis 2D).Ka hääbumisajas heade ja halbade väljasuremisrühmade vahel ei olnud algtaseme väljasuremiskoolituse perioodil olulist erinevust (U = 45,00, p = 0,799) (joonis 2D). Järgmiseks oli prooviploki (5 tooni ploki kohta) oluline peamine mõju ekstinktsioonitreeningu ajal külmumisele kulunud ajale (F (2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), mis näitab, et väljasuremise õppimine toimus (joonis 2D). ). Järgmiseks oli prooviploki (5 tooni ploki kohta) oluline peamine mõju ekstinktsioonitreeningu ajal külmumisele kulunud ajale (F (2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), mis näitab, et väljasuremise õppimine toimus (joonis 2D). ). Затем наблюдался значительный основной эффект пробного блока (5 тонов на блок) на время, затрачиваеремое на шения (F (2884, 54,80) = 8331, p <0,001), что указывает на то, что обучение угашению происходило ( 2D). Seejärel avaldas prooviploki (5 tooni ploki kohta) märkimisväärne põhimõju ekstinktsioonitreeningu ajal külmumiseks kuluvale ajale (F(2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), mis näitab, et ekstinktsiooniõpe toimus (joonis fig. 2D). ).接下来，在消退训练期间，试块（每块5 音）对冻结时间有显着的主有显着的主有显着的主效练.8.8. 31，p < 0,001），表明发生了消退学习（图2D）） .接下来，在消退训练期间，试块（每块5 音）对冻结时间有显着的主有显着的主有显着的主效练.8.8. 31，p < 0,001），表明发生了消退学习（图2D）） . Затем, во время обучения угашению, пробные блоки (5 тонов на блок) оказали значительное означительное означительное озновное влияние,8 80) = 8331, p <0,001), что указывает на то, что обучение угашению происходило (рис) 2D). Seejärel avaldasid ekstinktsiooniõppe ajal prooviplokid (5 tooni ploki kohta) märkimisväärset peamist mõju tuhmumisajale (F(2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), mis näitab, et ekstinktsiooniõpe toimus (joonis .2D). .Kuid ekstinktsioonirühmal (F(1, 19) = 3,091, p = 0,095) ei olnud kogu ekstinktsioonitreeningu perioodi jooksul märkimisväärset mõju tuhmumisajale ning katseploki ja ekstinktsioonirühma vahel ei olnud interaktsiooni (F(4) , 19)) .76) = 1,890, p = 0,121) (joonis 2D). Testimisseansi ajal oli hea väljasuremise, halva väljasuremise ja hirmu meenutamise rühmade vahel algperioodil külmumisele kulunud ajas oluline erinevus (X2 (2) = 8,569, p = 0,014), nii et hirmu meenutamise rühm tardus oluliselt rohkem kui hea väljasuremise rühm (keskmine astme erinevus = 10,57, p = 0,017), kuid mitte halb väljasuremisrühm (keskmine astme erinevus = - 3,714, p > 0,999) (joonis 2D). Testimisseansi ajal oli hea väljasuremise, halva väljasuremise ja hirmu meenutamise rühmade vahel algperioodil külmumisele kulunud ajas oluline erinevus (X2 (2) = 8,569, p = 0,014), nii et hirmu meenutamise rühm tardus oluliselt rohkem kui hea väljasuremise rühm (keskmine astme erinevus = 10,57, p = 0,017), kuid mitte halb väljasuremisrühm (keskmine astme erinevus = - 3,714, p > 0,999) (joonis 2D).Testiseansi ajal oli hea väljasuremise, halva väljasuremise ja hirmu meenutamise rühmade vahel algperioodil külmumisele kulunud ajas oluline erinevus (X2(2) = 8,569, p = 0,014), nii et hirmu meenutamise rühm tardus. oluliselt .больше, чем в группе хорошего вымирания (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), но не в группе ранрахым рангов = -3 714, p> 0 999) (2D). suurem kui hea väljasuremise rühmas (keskmine järgu erinevus = 10,57, p = 0,017), kuid mitte halva väljasuremise rühmas (keskmine järgu erinevus = -3,714, p > 0,999) (joonis 2D).在测试期间，良好消退组、不良消退组和恐惧回忆组在基线期冻结时送组在基线期冻结时送期冻结时间期冻结时间(2) = 8,569，p = 0,014），因此恐惧回忆组冻结显着超过良好的灭绝组（平均秩差= 10,57，p = 0,017），但不是差的灭绝组（平均秩差= – 3,714，p > 0,2＀9＀D在 测试 期间 ， 良好 消退组 、 消 退组 和 恐惧 在 基线期 冻结 旹退组 木 基线期 冻结 旹退组（（x2 (2) = 8,569 ， p = 0,014） ， 恐惧 回忆组 冻结 显着 良好 的 组 组 焄 组组 组 组（平均秩差 = 10,57, p = 0,017 8. е е гр гой с с припоминаниoneм страха с т сзи зрения времени замания нHO уодоg9, X2 (2). инание страха груа замерзает значително чаще , чем группа с хорошим вымиранием (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), но не группа с плохранним вымиранием ( -3714, p> 0999) (рис. 2D). Testimisperioodil oli hea väljasuremise grupi, halva väljasuremise grupi ja hirmu meeldejäämise rühma vahel oluline erinevus algtaseme külmumisaja osas (X2(2) = 8,569, p = 0,014), seega oli hirmu meenutamine. rühm külmub oluliselt sagedamini kui hea väljasuremisega rühm (keskmine järgu erinevus = 10,57, p = 0,017), kuid mitte halva väljasuremisega rühm (keskmine järgu erinevus = -3,714, p > 0,999) (joonis 2D).Hea väljasuremise rühmal, halva väljasuremise rühmal ja hirmu meenutamise rühmal olid ka testiseansi tooniesitluse ajal oluliselt erinevad tuhmumisajad (X2(2) = 14,93, p = 0,001), seega oli hea väljasuremise rühmal oluliselt vähem. aega.külmumisaeg kui nõrga väljasuremise rühmas (keskmine järgu erinevus = 9,286, p = 0,044) ja hirmumälu rühmas (keskmine järgu erinevus = 13,86, p = 0,001) (joonis 2D).
Individuaalsed erinevused väljasuremise mäletamisel.(A) Kirurgiliste ja käitumuslike protseduuride ülevaade.(B) Sagedusjaotus, mis näitab individuaalseid erinevusi kaduva mälu skoorides.(C) Tõendid selle kohta, et arvutatud väljasuremise tagasikutsumise skooride põhjal loodud rühmad esindavad kahte erinevat fenotüüpi.(D) Keskmine protsent ajast, mil rotid külmuvad halva väljasuremise, hea väljasuremise ja hirmu meeldejäämise tõttu 30-sekundilises konditsioneeritud hirmurefleksi seansi rakkudes, toonides 20, 30 sekundit, varisesid väljasuremise õppimise ajal 5 plokki (4 tooni) .igaüks) ja neljas toonis hääbumise ja hirmu mälestuste seanssides.Vearibad tähistavad keskmise standardhälvet. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p < 0,05,**p < 0,01,***p < 0,001,****p < 0,0001. *p < 0,05,**p < 0,01,***p < 0,001,****p < 0,0001. *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001.
IL-i süstiti retrograadne indikaator (joonis 3A) ja GFP+ rakkude arv piki huvipakkuva piirkonna eesmist-tagumist telge määrati (joonis 3B-F).GFP+ rakkude arvus esines oluline erinevus eesmise, keskmise ja tagumise PVT vahel (X2(2) = 8,200, p = 0,017), mistõttu mPVT näitas oluliselt rohkem GFP+ rakke kui aPVT (keskmine järjestus) Diff.= 18,37, p = 0,035) ja pPVT (keskmine järjestuse erinevus = 17,71, p = 0,045) (joonis 3C).Kuigi mitmed loomad ei tuvastanud pCLA-s ühtegi GFP+ rakku ega suutnud seetõttu aktiivsust selles piirkonnas kaardistada, ei olnud eesmise, keskmise ja tagumise CLA vahel olulist erinevust (X2(2) = 5,596, p = 0,061).GFP+ rakkude arv (joonis 3D).Seejärel, kuna aBLA-st või avHPC-st leiti mitmel rotil mõned GFP+ rakud, analüüsiti ainult nende piirkondade kesk- ja tagaosa.Keskmine ja tagumine BLA (U=393, p=0,009) erinesid oluliselt GFP+ rakkude arvu poolest, seega näitas pBLA rohkem IL-projektsioone kui mBLA (joonis 3E).Samamoodi esines märkimisväärne erinevus keskmise ja tagumise vHPC-de vahel, nii et pvHPC-d näitasid rohkem IL-projektsioone kui mvHPC-d (U = 403,5, p = 0,014) (joonis 3F).Joonis 3G on näidispilt, mis näitab Fos, aavRG-GFP ja topeltmärgistatud rakke.
Kvantifitseerige IL aferente kogu huvipakkuvas ajupiirkonnas.(A) AavRG-CAG-GFP jaotuse skemaatiline esitus kogu roti IL-s.(B) Retrograadsete markerite representatiivsed kujutised huvipakkuva ajupiirkonna erinevates anteroposterioorsetes kohtades.Retrograadse märgistuse kvantifitseerimine piki anteroposterioorset telge (C) paraventrikulaarne talamus, (D) rangluu, (E) basolateraalne mandlid ja (F) ventraalne hipokampus.(G) Tüüpilised pildid, mis näitavad retrograadset aavRG-märgistust, Fos-märgistust ning topelt-aavRG- ja Fos-märgistust aPVT-s.Vearibad tähistavad keskmise standardhälvet. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05,**p < 0,01. *p < 0,05,**p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01.Skaalariba 100 µm.Avalik ajukaart paneelil A on reprodutseeritud Swansoni (2004) Ajukaardist: Rat Brain Structure, 3. väljaanne, litsentsitud Creative Commonsi Attribution-NonCommons 4.0 rahvusvahelise litsentsi alusel (https://creativecommons.org/licenses/by-nc )./4.0/) on allalaadimiseks saadaval aadressil https://larrywswanson.com.
Globaalset ja IL-projektsioonispetsiifilist Fos-aktiivsust analüüsiti aPVT-s, mPVT-s ja pPVT-s kõigil rottidel.Fos-i ekspressioonis aPVT-s (X2(3) = 3,888, p = 0,274) ei olnud olulist erinevust hea väljasuremise, halva väljasuremise, hirmu meenutamise ja kodurakkude rühmade vahel (joonis 4A) ega ka olulist korrelatsiooni Fos-i vahel. aPVT-s ekspressiooni ja ekstinktsiooni tagasikutsumise vahel (rs = 0,092, p = 0,691) (joonis 4B) või aPVT IL-aferentide Fos-i ekspressiooni ja ekstinktsiooni tagasikutsumise vahel (rs = 0,143, p = 0,537) (joonis 4D).Kuid aPVT IL-i aferentide puhul erines Fos ekspressioon märkimisväärselt hea väljasuremise, halva väljasuremise, hirmu meenutamise ja kodurakkude rühmade vahel (X2(3) = 15,05, p = 0,002), seega näitas hirmu meenutamise rühm suhteliselt head väljasuremist.regressiooni (keskmine järgu erinevus = 11,54, p = 0,003), halva regressiooni (keskmine järgu erinevus = 10,57, p = 0,034) ja koduraku (keskmine järgu erinevus = 12,79, p = 0,005) rühmad (joonis 4C).Lisaks ei olnud mPVT-s Fos-i ekspressioonis (X2(3) = 2,272, p = 0,518) (joonis 4E) ja mPVT-s Fos-i ekspressioonis olulist erinevust hea väljasuremise, halva väljasuremise, hirmu meenutamise ja kodurakkude rühmade vahel..Märkimisväärne korrelatsioon väljasuremise meeldetuletusega (rs = 0,168 p = 0,468) (joonis 4F).Kuigi IL-aferentsetes mPVT rakkudes esines Fos ekspressioonis heade, halbade, hirmu meenutamise ja kodurakkude rühmade vahel märkimisväärne erinevus (X2(3) = 9,252, p = 0,026), ei näidanud post hoc võrdlus ühtegi või kahte.Olulised erinevused rühmade vahel (joonis 4G).Lisaks ei olnud olulist korrelatsiooni Fos ekspressiooni IL-aferentsetes mPVT rakkudes ja ekstinktsiooni tagasikutsumise vahel (rs = 0,174, p = 0,450) (joonis 4H). Järgmiseks oli hea väljasuremise, halva väljasuremise, hirmu meenutamise ja koduse puuri rühmade vahel pPVT-s Fos ekspressioonis oluline erinevus (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), nii et hea väljasuremise rühm (keskmine asetus) Erinevus = 14,96, p = 0,010), kuid mitte kehva väljasuremise (keskmine asetuse erinevus = 12,86, p = 0,113) ega hirmu meenutamise rühmas (keskmine asetuse erinevus = 2,571, p > 0,999), ei kuvata rohkem Fos-i kui kodupuuri rühm (joon. 4I). Järgmiseks oli hea väljasuremise, halva väljasuremise, hirmu meenutamise ja koduse puuri rühmade vahel pPVT-s Fos ekspressioonis oluline erinevus (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), nii et hea väljasuremise rühm (keskmine asetus) Erinevus = 14,96, p = 0,010), kuid mitte kehva väljasuremise (keskmine asetuse erinevus = 12,86, p = 0,113) ega hirmu meenutamise rühmas (keskmine asetuse erinevus = 2,571, p > 0,999), ei kuvata rohkem Fos-i kui kodupuuri rühm (joon. 4I). Далее, наблюдалась значительная разница между группами с хорошим угасанием, плохим угашением, омотзным еткой в ​​​​экспрессии Fos в pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), так что группа с хорошим угашением (средний рангением) Erinevus = 14,96, p = 0,010), но не в группе плохого угашения (средняя ранговая разница = 12,86, p = 0,113) ивраспи редняя ранговая разница = 2571, p > 0999), демонстрировалась более выраженная экспрессия Fos, чем в группе группа домашних клеток (рис. 4I). Lisaks oli pPVT-s Fos ekspressioonis oluline erinevus hea väljasuremise, halva väljasuremise, hirmu meenutamise ja kodurakkude rühmade vahel (X2 (3) = 13, 89, p = 0, 003), nii et hea väljasuremise rühm (keskmine aste Diff. = 14,96, p = 0,010), kuid mitte halva väljasuremise rühmas (keskmine järgu erinevus = 12,86, p = 0,113) ega hirmumälu rühmas (keskmine järgu erinevus = 2,571, p > 0,999), ei näidanud Fos väljendumist rohkem kui kodurakkude rühm (joonis 4I).其次 ， ppvt 中 fos 表达 好 消 、 差消 、 恐惧 和 家笼组 之间 存在 之间 存在 显着 Ｎ 3x2＂ x ， p = 0,003） 使得 消组 （（keskmine Rank Diff.= 14,96, p = 0,010)，但不是较差的消退(keskmine asetuse erinevus = 12,86, p = 0,113) 或恐惧弞忆组(keskmine asetus erinevus.)笼组（图4I ).= 14,96, p = 0,010)，但不是较差的消退(keskmine asetuse erinevus = 12,86, p = 0,113)）.Teiseks olid fos-i ekspressioonis pPVT-s olulised erinevused heade, halbade, hirmu meenutamise ja kodurakkude rühma vahel (X2(3) = 13,89, p = 0,003), moodustades hea sissevõtu rühma (keskmine järjestuse erinevus = 14,96)., p = 0,010), но не хуже по угашению (средняя разница рангов = 12,86, p = 0,113) или группе отзыва =7 отзыва страха, 1 , p > 0,999), чем в группе домашней клетки (рис. 4I) . , p = 0,010), kuid mitte halvem väljasuremise (keskmine järgu erinevus = 12,86, p = 0,113) ega hirmu meenutamise rühmas (keskmine järgu erinevus = 2,571, p > 0,999) kui koduraku rühm (joonis 4I)..Siiski ei olnud pPVT Fos ekspressiooni ja väljasuremise tagasikutsumise vahel olulist korrelatsiooni (rs = 0,051, p = 0,825) (joonis 4J).Lõpuks ilmnes oluline erinevus Fos ekspressioonis pPVT IL aferentides hea väljasuremise, halva väljasuremise, hirmumäludega rühmade ja kodurakkude vahel (X2(3) = 12,34 p = 0,006), seega oli hea Fos ekspressioon IL-s. halvem kui väljasuremisrühmades (keskmine järgu erinevus = 12,54, p = 0,014) ja kodurakus (keskmine järgu erinevus = 12,89, p = 0,049) (joonis 4K) ning korreleerus oluliselt IL-aferentidega pPVT-s. Aktiveerimise ja väljasuremise tühistamine, parem väljasuremine oli seotud nende IL-aferentide suurema aktiveerumisega (rs = -0,438, p = 0,047) (joonis 4L).
Fos aktiivsus suurenes rottidel tagumise paraventrikulaarse talamuse (PVT) IL-aferentides, mis näitas head regressiooni.(A) Fos ekspressioonis aPVT-s rühmade vahel olulisi erinevusi ei olnud.(B) Fos ekspressiooni ja väljasuremise tagasikutsumise vahel aPVT-s olulist korrelatsiooni ei olnud.(C) Hirmu meenutamise rühm näitas kõigi teiste rühmadega võrreldes suurenenud Fos-i ekspressiooni IL-aferentides.(D) Fos ekspressiooni vahel IL-i aferentides ja aPVT-s väljasuremise tagasikutsumise vahel ei olnud olulist korrelatsiooni.(E) Fos ekspressioonis mPVT-s olulisi rühmadevahelisi erinevusi ei olnud.(F) Fos ekspressiooni ja väljasuremismälu vahel mPVT-s olulist korrelatsiooni ei olnud.(G) Fos ekspressioon aferentsetes IL-rakkudes mPVT-s ei erinenud rühmade vahel oluliselt.(H) Fos-i ekspressiooni vahel IL-aferentides ja mPVT-s väljasuremise tagasikutsumise vahel ei olnud olulist korrelatsiooni.(I) Hästi väljasurnud rühmal, kuid mitte ühelgi teisel rühmal, oli suurenenud Fos aktiivsus pPVT-s võrreldes kodupuuri rühmaga.(J) Fos ekspressiooni ja väljasuremise tagasikutsumise vahel pPVT-s ei olnud olulist korrelatsiooni.(K) Hea väljasuremisrühm näitas IL-i aferentsetes rakkudes suurenenud Fos-i ekspressiooni võrreldes nõrga väljasuremisrühma ja kodurakkude rühmaga.(L) Fos ekspressiooni vahel IL-aferentides ja väljasuremise tagasikutsumise vahel on märkimisväärne korrelatsioon, seega on hea väljasuremise tagasikutsumine seotud suurema Fos-i ekspressiooniga IL-aferentides.Vearibad tähistavad keskmise standardhälvet. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05,**p < 0,01. *p < 0,05,**p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01.
Seejärel analüüsiti kõigis rühmades globaalset ja IL-projektsioonispetsiifilist Fos-i aktiivsust rottide aCLA-s ja mCLA-s. Hea väljasuremise, halva väljasuremise, hirmu meeldejäämise ja koduse puuri rühmade vahel esines oluline erinevus Fos-i ekspressioonis aCLA-s (X2 (3) = 8,455, p = 0,036), nii et hirmu meeldejätmise rühm (keskmise astme erinevus = 14,50, p = 0,049), kuid ei vaeste (keskmine asetuse erinevus = 10,21, p = 0,373) ega hea väljasuremisvõimega rühmad (keskmine asetuse erinevus = 4,607, p > 0,999) ei näidanud rohkem Fos-i väljendust kui kodupuuri rühm ( joonis 5A). Hea väljasuremise, halva väljasuremise, hirmu meeldejäämise ja koduse puuri rühmade vahel esines oluline erinevus Fos-i ekspressioonis aCLA-s (X2 (3) = 8,455, p = 0,036), nii et hirmu meeldejätmise rühm (keskmise astme erinevus = 14,50, p = 0,049), kuid ei vaeste (keskmine asetuse erinevus = 10,21, p = 0,373) ega hea väljasuremisvõimega rühmad (keskmine asetuse erinevus = 4,607, p > 0,999) ei näidanud rohkem Fos-i väljendust kui kodupuuri rühm ( joonis 5A). Между группами с хорошим угашением, плохим угашением, припоминанием страха и домашнатраха и домашними клетками ца в экспрессии Fos в aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036), так что группа припоминания страха (среднее ранговое разли,1,54 разли, = 0,049), но ни плохая (средняя ранговая разница = 10,21, p = 0,373), ни группа с хорошим вымиранием (средняя ранговая разница, 0,9 = 9,9 9) не демонстрировали большей экспрессии Fos, чем группа в домашней клетке ( Рис 5А). Hea väljasuremise, halva väljasuremise, hirmu meenutamise ja kodurakkude rühmade vahel oli aCLA Fos ekspressioonis oluline erinevus (X2(3) = 8,455, p = 0,036), nii et hirmu meenutamise rühm (keskmine järjestuse erinevus = 14,50, p = 0,049), kuid ei vaestel (keskmine järgu erinevus = 10,21, p = 0,373) ega heal väljasuremisrühmal (keskmine järgu erinevus = 4,607, p > 0,999) ei ilmnenud rohkem Fos ekspressiooni kui kodurakkude rühmas (joonis .5A) . aCLA 中Fos 表达的良好消退、消退差、恐惧回忆和家庭笼组之间存在显着 =0.4.5)5,(X2＾着)因此恐惧回忆组(keskmine asetuse erinevus = 14,50，p = 0,049），但无论是差（平均秩差= 10,21，p = 0,373）还是良好灭缻，.9（平均缻，（平均缯差.都显示出比家庭笼组更多的Fos 表达（图5A) . Acla 中 fos 表达 的 消退 、 消退差 、 回忆 和 家庭 笼组 之间 存弨 宮 弨 宾睂 差异 (x2 (3) = 8,455, p = 0,036) ， 因此 恐惧 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 (keskmine Aste erinevus = 14,50 ， P = P = P = P = P = 14. 0,049） ， 但 无论是 差 平均 秩差 秩差 = 10,21 ， 37 p = 0.平均 秩差 秩差 = 4,607 ， p> 0,999） 组 都 出 比 家庭 笼组 更 多 的 表达 图 图 图 5a) 。 Была значительная разница между группами с хорошим угашением, плохим угашением, отзывом страхпахпом ссии Fos в aCLA (X2(3) = 8,455, p = 0,036), поэтому группа отзыва страха (среднее ранговое различие = 14,50) , p = 0,049), но группы с плохим (средняя разница рангов = 10,21, p = 0,373) и с хорошим вымиранием, = p4,07 (средняя разн607) показали более высокую экспрессию Fos, чем группа с домашней клеткой (рис. 5A). Hea väljasuremise, halva väljasuremise, hirmu meenutamise ja kodurakkude rühmade vahel oli oluline erinevus aCLA Fos ekspressioonis (X2(3) = 8,455, p = 0,036), seega hirmu meenutamise rühm (keskmine järgu erinevus = 14,50), p = 0,049 ), kuid kehva (keskmine järgu erinevus = 10,21, p = 0,373) ja hea väljasuremisega (keskmine järgu erinevus = 4,607, p > 0,999) rühmad näitasid kõrgemat Fos ekspressiooni kui kodurakkude rühm (joonis 5A). .Globaalse Fos-i ekspressiooni (rs = 0,036, p = 0,876) (joonis 5B) või Fos-i ekspressiooni IL aCLA aferentsetes rakkudes (rs = -0,282, p = 0,215) ja väljasuremise meeldetuletuse (joonis 5B) vahel olulist korrelatsiooni ei leitud..5D), ei olnud ka olulist erinevust hea väljasuremise, halva väljasuremise, hirmu meenutamise ja kodurakkude rühmade vahel Fos ekspressioonis aCLA IL aferentides (X2(3) = 6,722, p = 0,081) (joonis 5C)..). Järgmiseks oli hea väljasuremise, halva väljasuremise, hirmu meenutamise ja kodupuuri rühmade vahel mCLA-s Fos ekspressioonis oluline erinevus (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), nii et hea väljasuremise rühm (keskmise astme erinevus = 12,93, p = 0,038), kuid ei kehva väljasuremise (keskmine asetuse erinevus = 5,143, p > 0,999) ega hirmu meenutamise rühmad (keskmine asetuse erinevus = 14,00, p = 0,063) ei näidanud mCLA-s oluliselt rohkem Fos-i ekspressiooni. võrreldes kodupuuri rühmaga (joonis 5E). Järgmiseks oli hea väljasuremise, halva väljasuremise, hirmu meenutamise ja kodupuuri rühmade vahel mCLA-s Fos ekspressioonis oluline erinevus (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), nii et hea väljasuremise rühm (keskmise astme erinevus = 12,93, p = 0,038), kuid ei kehva väljasuremise (keskmine asetuse erinevus = 5,143, p > 0,999) ega hirmu meenutamise rühmad (keskmine asetuse erinevus = 14,00, p = 0,063) ei näidanud mCLA-s oluliselt rohkem Fos-i ekspressiooni. võrreldes kodupuuri rühmaga (joonis 5E). Затем наблюдалась значительная разница между группами с хорошим угашением, плохим угашенияпод, имостельная воесяпод шней клеткой в ​​​​экспрессии Fos в mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), так что группа с хорошим угашением (срезницая) рангов = 12,93, p = 0,038), но ни группы плохого угашения (средняя ранговая разница = 5143, p > 0,999), ни группы плохого угашения (средняя ранговая разница = 5143, p > 0,999), говая разница = 14,00, p = 0,063) не показали значительно большей экспрессии Fos в mCLA. Siis oli mCLA Fos ekspressioonis hea väljasuremise, halva väljasuremise, hirmumälestuste ja kodurakkude rühmade vahel märkimisväärne erinevus (X2(3) = 10,12, p = 0,018), nii et hea väljasuremise rühm (keskmine erinevus auaste = 12,93, p = 0,038), kuid ei halva väljasuremise rühmad (keskmine järgu erinevus = 5,143, p > 0,999) ega hirmu meenutamise rühmad (keskmine järgu erinevus = 14,00, p = 0,063) ei näidanud mCLA-s oluliselt suuremat Fos-i ekspressiooni.võrreldes kodupuuri rühmaga (joonis 5E).接下来 ， 在 mcla 中 的 fos 表达 ， 良好 消退组 、 不良 消 退组 、 退组 、 恐惧 回显着 差异 (x2 (3) = 10,12 ， p = 0,018) ， 良好 （((()) （(（ Keskmise asetuse erinevus .= 12,93, p = 0,038)，但在mCLA 中，弱消退（平均秩差= 5,143，p > 0,999）和恐惧回和恐惧回和恐惧回 ，p = 0,063）均未显示出更多的Fos 表达相对于家庭笼组（图5E）. = 12,93, p = 0,038) ， 在 在 mcla 中 ， 弱消退 （平均 秩差 秩差 秩差 秩差 秩弮 廿 咞 99， p> 0.平均 秩差 = 14,00 ， p = 0,063） 未 显示 出 更 多 的fos 表达 表达 的 fos 表达 表达 的 fos 表达相对于家庭笼组（图5E）. Далее, в экспрессии Fos в mCLA наблюдалась значительная разница между группой с хорошим угасанием, гасанием, групой руппой с отзывом о страхе и группой с домашней клеткой (X2(3) = 10,12, p = 0,018), так, группа хороше угашения (средняя разность рангов = 12,93, p = 0,038), но в mCLA ни слабое угасание (средняя разница рангов = 5,143, 9 p.) раха (средняя разница рангов = 14,00, p = 0,999) = 0,063) показали лучшую экспрессию Много Fos по сравнению с группой с домашней клеткой (Рисунок 5E). Lisaks oli mCLA-s märkimisväärne erinevus Fos ekspressioonis hea väljasuremise rühma, halva väljasuremise rühma, hirmu tagasiside rühma ja kodurakkude rühma vahel (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), seega on hea väljasuremine (keskmine järgu erinevus = 12,93, p = 0,038), kuid mCLA-s ei näidanud paremat ei nõrk väljasuremine (keskmine järgu erinevus = 5,143, p > 0,999) ega hirmu meenutamise rühm (keskmine järgu erinevus = 14,00, p = 0,999) = 0,063 Multi Fos ekspressioon võrreldes kodurakkude rühmaga (joonis 5E).Globaalne Fos ekspressioon mCLA-s (rs = 0,321, p = 0,156) (joonis 5F) või aferentsetes IL-i mCLA rakkudes (rs = -0,121, p = 0,602) ja väljasuremise tagasikutsumises (joonis 5H) aga olulist erinevust rühmad, millel on hea väljasuremine, halb väljasuremine, hirmu meenutamine ja kodurakk Fos ekspressiooniks IL mCLA aferentsetes rakkudes (X2 (3) = 4,923, p = 0,178) (joonis 5G).
Hea väljasuremismäluga rottidel oli fossi aktiivsus kõrgenenud klausli keskosas.(A) Hirmu meenutamise rühm, kuid mitte teised rühmad, näitas aCLA-s suurenenud Fos-i aktiivsust võrreldes kodurakkude rühmaga.(B) Fos ekspressiooni aCLA-s ja väljasuremise tagasikutsumise vahel ei olnud olulist korrelatsiooni.(C) Fos ekspressioon IL-i aferentsetes aCLA rakkudes ei erinenud rühmade vahel oluliselt.(D) Fos ekspressiooni IL-i aferentides ja väljasuremise tagasikutsumise vahel aCLA-s ei olnud olulist korrelatsiooni.(E) Hästi väljasurnud rühmal, kuid mitte teistel rühmadel, oli mCLA-s suurenenud Fos aktiivsus võrreldes kodurakkude rühmaga.(F) Fos ekspressiooni ja väljasuremise tagasikutsumise vahel mCLA-s olulist korrelatsiooni ei olnud.(G) Fos ekspressioon IL mCLA aferentsetes rakkudes ei erinenud rühmade vahel oluliselt.(H) Fos ekspressiooni IL-i aferentides ja väljasuremise tagasikutsumise vahel mCLA-s ei olnud olulist korrelatsiooni.Vearibad tähistavad keskmise standardhälvet. *p < 0,05. *p < 0,05. *р < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *р < 0,05. *p < 0,05.
Seejärel analüüsiti kõigis rotirühmades globaalset ja IL-projektsioonispetsiifilist Fos-i aktiivsust mBLA-s ja pBLA-s.Fos ekspressioonis mBLA-s (X2 (3) = 0,944, p = 0,815) ei olnud olulist erinevust hea väljasuremise, halva väljasuremise, hirmu meenutamise ja kodurakkude rühmade vahel (joonis 6A).Samuti ei ilmnenud olulist erinevust hea regressiooni, halva regressiooni, hirmu meenutamise ja koduraku Fos ekspressiooniga rühmade vahel IL mBLA aferentsetes rakkudes (X2(3)=0,518, p=0,915) (joonis 6C).Lisaks ei ilmnenud olulist korrelatsiooni globaalse Fos-i ekspressiooni vahel mBLA-s (rs = 0,126, p = 0,588) (joonis 6B) ja Fos-i ekspressiooni vahel IL-i mBLA aferentsetes rakkudes (rs = 0,200, p = 0,385) (rs = 0,200, p). = 0,385).p = 0,385).Joonis 6D) ja väljasuremise meenutamine.Samuti ei ilmnenud olulist erinevust hea väljasuremise, halva väljasuremise, hirmumälu ja kodurakkude rühmades Fos-i ekspressioonis pBLA-s (X2(3) = 4,246, p = 0,236) (joonis 6E) ja samuti ei olnud olulist erinevust. pBLA-s Hea.väljasuremine, halb väljasuremine, hirmu meenutamine ja kodurakkude rühmad Fos-i ekspressioonis IL-i aferentsetes rakkudes (X2 (3) = 1,954, p = 0,582) (joonis 6G).Lõpuks globaalne Fos ekspressioon pBLA-s (rs = 0,070, p = 0,762) (joonis 6F) ja Fos ekspressioon pBLA IL-i aferentsetes rakkudes (rs = 0,122, p = 0,597) ja väljasuremise tagasikutsumine (joonis 6H).
Individuaalseid erinevusi väljasuremise paljunemises ei kaardistatud erinevustega Fos ekspressioonis basolateraalses amygdalas.(A) Fos ekspressioonis mBLA-s olulisi rühmadevahelisi erinevusi ei olnud.(B) Fos ekspressiooni ja väljasuremise tagasikutsumise vahel mBLA-s olulist korrelatsiooni ei olnud.(C) Fos ekspressioon IL mBLA aferentsetes rakkudes ei erinenud rühmade vahel oluliselt.(D) Fos ekspressiooni IL-i aferentsetes rakkudes ja väljasuremise tagasikutsumise vahel mBLA-s ei olnud olulist korrelatsiooni.(E) Fos ekspressioonis pBLA-s olulisi rühmadevahelisi erinevusi ei olnud.(F) Fos ekspressiooni ja väljasuremise tagasikutsumise vahel pBLA-s olulist korrelatsiooni ei olnud.(G) Fos ekspressioon aferentsetes IL pBLA rakkudes ei erinenud rühmade vahel oluliselt.(H) Fos ekspressiooni IL-i aferentsetes rakkudes ja väljasuremise tagasikutsumise vahel pBLA-s ei olnud olulist korrelatsiooni.Vearibad tähistavad keskmise standardhälvet.
Lõpuks analüüsiti kõigi rottide globaalset ja IL-projektsioonispetsiifilist Fos-aktiivsust mvHPC-s ja pvHPC-s. Hea väljasuremise, halva väljasuremise, hirmu meenutamise ja koduse puuri rühmade vahel oli mvHPC-s Fos ekspressioonis oluline erinevus (X2 (3) = 8,056, p = 0,045), nii et hea väljasuremine (keskmise astme erinevus = 13,29) , p = 0,031), kuid ei kehva väljasuremise (keskmine asetuse erinevus = 6,857, p > 0,999) ega hirmu meeldejäämise (keskmine asetuse erinevus = 8,000, p = 0,864) rühmad ei näidanud rohkem Fos-i ekspressiooni kui kodupuuri rühm (joonis fig. 7A). Hea väljasuremise, halva väljasuremise, hirmu meenutamise ja koduse puuri rühmade vahel oli mvHPC-s Fos ekspressioonis oluline erinevus (X2 (3) = 8,056, p = 0,045), nii et hea väljasuremine (keskmise astme erinevus = 13,29) , p = 0,031), kuid ei kehva väljasuremise (keskmine asetuse erinevus = 6,857, p > 0,999) ega hirmu meeldejäämise (keskmine asetuse erinevus = 8,000, p = 0,864) rühmad ei näidanud rohkem Fos-i ekspressiooni kui kodupuuri rühm (joonis fig. 7A). Между группами с хорошим угасанием, плохим угашением, отзывом страха и домашними клетьазначалсами наблю экспрессии Fos в mvHPC (X2 (3) = 8056, p = 0045), так что хорошее угасание (средняя ранговая разница = 13,29) , p, p = 0,031), но ни в группах с плохим угасанием (средняя ранговая разница = 6,857, p > 0,999), ни в группах с отзнрая зница = 8000, p = 0,864) экспрессия Fos была выше, чем в группе с домашней клеткой (рис. 7А). Hea väljasuremise, halva väljasuremise, hirmu meeldejäämise ja kodurakkude vahel oli mvHPC Fos ekspressioonis oluline erinevus (X2(3) = 8,056, p = 0,045), seega hea väljasuremine (keskmine järjestuse erinevus = 13,29), p = 0,031), kuid ei halva väljasuremise rühmas (keskmine järgu erinevus = 6,857, p > 0,999) ega hirmu meenutamise rühmas (keskmine järgu erinevus = 8,000, p = 0,864) ei olnud Fos ekspressioon kõrgem kui kodurühmas.rakk (joonis 7A). mvHPC 中Fos 表达的良好消退、不良消退、恐惧回忆和家庭笼组之间存在戮间存在显着) =0.0.3巨显着45），因此良好消退（平均秩差= 13,29），p = 0,031 ），但无论是弱消退（平均秩差= 6,857，p > 0,999）还是恐惧回忆）平均=秩.0）（平均秩忆（平均=秩.0（平均秩差.都显示出比家庭笼组更多的Fos 表达（图2）. mvhpc 中 fos 表达 的 消退 、 不良 消退 恐惧 回忆 和 家庭 笼组 伋间 存在 之间 存在 显 退 存在 消退 和 家庭 笼组 之间 存在 消退56, p = 0,045） ， 良好 （（平均 秩差 秩差 = 13,29） p = 0,031） ， 但 无论是 弱消退 （平均 秩差 秩差 = 6,857 ， p> 0,999） 还是 恐惧 （平 恐惧 （平 恐惧 （平p = 0,864） 组都 出 家庭 笼组 多 的 fos 表达 图 图。。。. ）))) Имелась значительная разница между группами «хорошо», «плохо», «припоминание страха» и «момашня» клетес (3) = 8056, p = 0,045) и, следовательно, хорошая регрессия (средняя разница рангов = 13,29), p = 0,031), но группы со слабым угасанием (средняя разница рангов = 6857, p > 0,999) и воспоминния (. резранния) 8000, p = 0,864) показали более высокую экспрессию Fos, чем группа в домашней клетке (рис. 2). Hea, halb, hirmu meenutamise ja koduraku rühmade vahel oli mvHPC-s Fos ekspressiooni osas oluline erinevus (X2(3) = 8,056, p = 0,045) ja seetõttu oli hea regressioon (keskmine järjestuse erinevus = 13,29), p = 0,031), kuid nõrga väljasuremise (keskmine järgu erinevus = 6,857, p > 0,999) ja hirmumälestustega (keskmine järgu erinevus = 8,000, p = 0,864) rühmad näitasid kõrgemat Fos-i ekspressiooni kui kodupuuris olnud rühmad (joonis 2).7A).Olulist erinevust siiski polnud (X2(3) = 4,893, p = 0,180) (joonis 7C).Lisaks ei leitud olulist korrelatsiooni globaalse Fos ekspressiooni vahel mvHPC-s (rs = -0,233, p = 0,309) (joonis 7B) ja Fos ekspressiooni vahel mvHPC aferentsetes IL-rakkudes (rs = 0,056, p = 0,810) (joonis 7D).ja aruanne kadumise kohta.Lisaks ei olnud pvHPC-s Fos ekspressioonis olulist erinevust hea väljasuremise, halva väljasuremise, hirmu meenutamise ja kodurakkude rühmade vahel (X2(3) = 3,623, p = 0,353) (joonis 7E) ja olulisi erinevusi ei olnud.erinevus Fos ekspressiooni heas regressioonis pvHPC aferentsetes IL-rakkudes, halb regressioon, hirmumälu ja kodurakkude rühmad (X2(3)=3,871, p=0,276) (joonis 7G).Lõpuks ei olnud olulist korrelatsiooni pvHPC globaalse Fos ekspressiooni (rs = -0,127, p = 0,584) (joonis 7F) ja Fos ekspressiooni vahel IL-aferentsetes pvHPC rakkudes (rs = 0,176, p = 0,447) ja väljasuremise tagasikutsumise vahel (joonis 7F). ).7H).
Fos ekspressioon on kõrgenenud rottide ventraalses hipokampuses, mis viitab heale mälu väljasuremisele.(A) Hästi väljasurnud rühm, kuid mitte teised rühmad, näitas mvHPC-s Fos-i suurenenud ekspressiooni võrreldes kodurakkude rühmaga.(B) Fos ekspressiooni ja väljasuremise tagasikutsumise vahel mvPHC-s olulist korrelatsiooni ei olnud.(C) Fos ekspressioon mvHPC aferentsetes IL-rakkudes ei erinenud rühmade vahel oluliselt.(D) Fos ekspressiooni vahel IL-i aferentides ja väljasuremise tagasikutsumise vahel mvHPC-s ei olnud olulist korrelatsiooni.(E) Fos ekspressioonis pvHPC-s rühmade vahel olulisi erinevusi ei olnud.(F) Fos ekspressiooni ja väljasuremise tagasikutsumise vahel pvHPC-s ei olnud olulist korrelatsiooni.(G) Fos ekspressioon pVHPC aferentsetes IL-rakkudes ei erinenud rühmade vahel oluliselt.(H) Fos ekspressiooni vahel IL-i aferentides ja väljasuremise tagasikutsumise vahel pvHPC-s ei olnud olulist korrelatsiooni.Vearibad tähistavad keskmise standardhälvet. *p < 0,05. *p < 0,05. *р < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *р < 0,05. *p < 0,05.Meie kõigi piirkondade esmane analüüs näitas võrdlust kolmel tasandil piki anteroposterioorset telge, kuigi analüüsisime ka iga piirkonda, mis varises piki anteroposterioorset telge.Nende analüüside tulemused on esitatud tabelis 1.
Siin testisime, kas individuaalsed erinevused väljasuremise meenutamisel peegelduvad aferentse aktiivsuse erinevates mustrites alumises limbilises ajukoores.Selleks hindasime pärast ekstinktsiooni taasesitamist Fos-i aktiivsust paraventrikulaarsest talamusest, klaustrumist, basolateraalsest mandlitest ja ventraalsest hipokampusest pärit IL-projektsioonides.IL-i projitseerivates rakkudes leidsime PVT tagumises piirkonnas kõrgemat aktiivsust rottidel, kellel oli hea väljasuremisvõime, võrreldes halva väljasuremisega rottidega.Klavikulaarse tuuma, ventraalse hipokampuse ega basolateraalse mandli IL-aferentide osas ei esinenud erinevusi.Lisaks IL-i projitseerivatele rakkudele täheldati hea eraldusvõimega suurenenud neuraalset aktiivsust roti klaustri ja ventraalse hipokampuse valitud piirkondades.Meie tulemused näitavad, et edukas väljasuremismälu on korraldatud spetsiifiliste PVT projektsioonide abil IL-i ja mitte-IL-sihtivate rakkude suhtes klauslis ja ventraalses hipokampuses.
Leidsime, et PVT IL-i ennustamine oli aktiivne rottidel, kellel oli hea väljasuremise meeldetuletus, mis on kooskõlas hiljutise uuringuga, mis näitas, et väljasuremise tagasikutsumiseks on vaja PVT-d.Selles uuringus ei kasutatud alampiirkonnaspetsiifilisi manipuleerimisi, kuid see näitas, et väljasuremise taastootmiseks on vaja nii PVT projektsioone külgmises tsentraalses mandelkehas kui ka IL projektsioone PVT-s.Meie tulemused näitavad, et lisaks IL-PVT-CeL ahelale võib kustutamise tagasikutsumiseks olla vajalik ka PVT-järgne sisenemine IL-i.Seega selgub, et väljasuremise taastootmises osalevad nii eferentsed kui ka aferentsed IL-ühendused.Järgmine oluline samm on kindlaks teha, mis põhjustab pPVT signaali väljasuremise taastootmisest närviahela tasemel.Lisaks suhtele IL-ga on varasemad kanalite jälgimise uuringud 31, 32 näidanud, et pPVT saab sisendi ventraalsest periaqueductal hallist (vPAG), mis on seotud väljasuremise õppimisega 33, 34, 35, 36.Kuigi vPAG-i rolli väljasuremise tagasikutsumises ei ole kindlaks tehtud, on vPAG-i pPVT-prognoos atraktiivne kandidaat nende tiheduse ja mõlema piirkonna kaasamise tõttu varasemate tõendite loomisel hirmu väljasuremise kohta.
Meie PVT tulemuste teine ​​oluline aspekt on see, et need on spetsialiseerunud piki oma eesmist-tagamist telge.Silmatorkavalt korreleerub PVT projektsiooni neuronaalne aktiivsus IL-s vastupidise käitumusliku olekuga, nii et PVT-eelne projektsiooni aktiivsus IL-is on seotud hirmu meenutamisega, samas kui pPVT projektsioon on aktiivne pärast edukat meenutamise väljasuremist (st hirmu).See funktsionaalne heterogeensus PVT-s ei ole üllatav, arvestades eelnevat tööd [arutatud 37].Silmatorkav näide PVT funktsionaalse jaotuse kohta on hiljuti ilmnenud uuringus, mis on iseloomustanud PVT spetsiifiliste rakutüüpide omadusi.See uuring näitab, et DRD2 ekspresseerivad dopamiinirakud ekspresseeritakse valdavalt pPVT-s, innerveerivad esijäseme ajukoort ja reageerivad aversiivsetele stiimulitele.Teist rakupopulatsiooni ekspresseeritakse valdavalt aPVT-s ja see tähistab üleminekut madala füsioloogilise erutuse seisundisse ja innerveerib alajäsemete ajukoore.Meie tulemused ei sobi sellesse mustrisse, kuna IL-i projitseerivad aPVT rakud on hirmu meenutamise ajal aktiivsed, samas kui pPVT projektsioonid on aktiivsed ja loomadel on madal hirmutase.Näivale lahknevusele on vähemalt kaks võimalikku seletust.Esiteks, tuvastatud rakutüübid ei asu ainult TVV ühes eesmises-tagumises kohas.Seega võivad hea ekstinktsioonimäluga rottide aktiivsed IL-i projitseerivad pPVT-rakud kuuluda rakkude klassi, mida aPVT-s tõenäolisemalt tuvastatakse ja mis annavad märku üleminekust madalale erutusseisundile.Sama võib kehtida pärast hirmumälu aktiveeritud IL-i projitseerivate rakkude kohta aPVT-s.Teiseks on varasemad jälgimisuuringud tuvastanud IL3 projitseerivate pPVT-de olemasolu, kuigi mõned näivad olevat pärinevad DRD2-d sisaldavatest rakkudest, võivad teised rakutüübid projitseerida IL-i ja aktiveeruda pärast kustutamise edukat paljunemist.
Kuigi selle uuringu eesmärk oli tuvastada erinevusi erinevate väljasuremisfenotüüpidega rottide vahel, selgusid need katsed ka uusi hirmumälu mehhanismidega seotud andmeid.Huvitaval kombel avastasime hirmumäluga rottidel fossi aktiivsuse suurenemise eesmises CLA-s.
Randluu paikneb kortikaalse suhtluse keskpunktina ja osaleb protsessides, mis ulatuvad sensoorsest integratsioonist kuni tähelepanu ja uneni40, 41, 42, 43.On vähe tõendeid selle kohta, kuidas klausrum osaleb hirmu kujundamises või hirmu väljendamises, kuid varasemad uuringud on näidanud, et kontekstuaalne hirmu väljendus on seotud fosi aktiivsusega klausris.Hiljuti on teatatud, et entorhinaalse ajukoore atresia projektsioonide pärssimine kontekstuaalse hirmu konditsioneerimise ajal kahjustab pikaajalist mälu teket, kuigi nende vajadust hirmu väljendamise järele ei ole testitud.Samas uuringus täheldati Fos-i aktivatsiooni suurenemist, kui loomad puutusid kokku uue keskkonnaga, võrreldes hiirtega, kes puutusid kokku tuttava keskkonnaga.Seda silmas pidades võib CLA aktiveerimine, millest me siin teatame, tuleneda pigem kokkupuutest uue kaameraga testimise ajal, mitte aga hirmust enda tagasikutsumise ees.Lukkude funktsiooni täpsemaks iseloomustamiseks hirmu ja olukorra töötlemisel tuleks tulevastes uuringutes kasutada sihipärast lukuga manipuleerimist.
Kuigi eelmine töö on näidanud, et PVT on seotud hirmumälu ekspressiooniga, ei täheldanud me rottidel fossi koguekspressiooni muutusi, kui nad meenutasid hirmu 48 tundi pärast konditsioneerimist.Seda erinevust saab seletada mitme teguriga, sealhulgas varasema töö testimise hirmuga diskreetsete näpunäidete ees samas kontekstis, kus konditsioneerimine toimus, samas kui meie katses viidi testimine läbi uues ruumis.Lisaks surmasime oma loomad 60 minutit pärast testimist, samas kui eelmises töös kasutati ajapunkti 90 minutit.Lõpuks viidi eelmistes uuringutes test läbi ruumis, kus loomad said isuga reageerida, meie töös aga testiti rotte ilma isu vastuseta.Kuigi see võimaldab teatud määral konditsioneeritud pärssimist, on tõendeid selle kohta, et kui lubada loomadel piirata survet toidu hankimiseks, kontrollides, kas nad kardavad vihjeid, tekitab motivatsioonikonflikti (st hirm versus tasu), mis on peamine stimuleeriv tegur.osavõtt PVT48, 49. .
Basolateraalne mandelkeha on teadaolevalt seotud hirmu väljasuremise omandamisega 50, 51 ja on tõendeid selle kohta, et selles protsessis on kaasatud ka BLA projektsioonid IL-le23.Siiski pole selge, kas BLA ja selle ühendused on väljasuremise tagasitulekuga seotud.Pildiuuringud 23, 28 on näidanud BLA aktiivsuse suurenemist loomadel, kes meenutavad tuhmunud mälestusi.Kuigi meie eelmine töö ei näidanud erinevust BLA aktivatsioonis heade ja halbade väljasuremisrottide vahel, näitavad meie tulemused siin, et väljasuremise tagasikutsumine ei mõjuta üldiselt BLA-d ega aktiveerimist BLA IL-i ennustamisel.Kooskõlas meie järeldustega, kuigi vooluringi manipuleerimise uuringud näitavad, et IL-i sisendid BLA-sse on väljasuremise õppimiseks olulised, ei ole need väljasuremise meeldetuletamiseks vajalikud.Siiski ei saa BLA rolli täielikult ignoreerida, kuna hiljutised tõendid näitavad, et väljasuremise taastootmiseks on vaja BLA teatud rakutüüpe.
Eelkõige ei põhjustanud hirmu meenutamine BLA-s Fosi aktiveerumist, kuna varasemad kahjustuste, ravimite ja pildistamise uuringud on seostanud seda piirkonda hirmu väljendamise ja/või hirmu taastamisega pärast otsimist54, 55, 56, 57.Siin esitatud andmed ühendavad amügdala basaalse ja külgmise alamtuuma ning varasemad andmed viitavad sellele, et hirmu ekspressioon juhib Fosi aktiivsust külgmise tuuma dorsaalsel küljel.Analüüsisime alus- ja külgmisi andmeid eraldi, kuid kummalgi juhul ei olnud erinevusi (andmeid pole näidatud) ja mõlemad alad varisesid siin esitatud andmetes.Me ei analüüsinud külgmise amügdala alampiirkondi, seega võivad konkreetsed muutused selles piirkonnas olla varjatud.Teine võimalus, et fossi aktiivsus BLA-s ei muutu, on tingitud hirmumälestuste ajastusest võrreldes konditsioneerimisega.Mõned varasemad tööd on näidanud, et BLA panus hirmu ekspressioonisse väheneb aja jooksul pärast konditsioneerimist, nii et ekspressioon on BLA-st sõltuv 24 tundi pärast konditsioneerimist, kuid sõltumatu 7 päeva pärast (viide 45, kuid vt 58).toimus 48 tundi pärast treeningut, mistõttu Fos aktiivsuse muutuste puudumine sellel ajahetkel peegeldab tõenäoliselt ajast sõltuvaid muutusi BLA osalemises hirmu väljendamisel.
Lõpuks leiame tõendeid selle kohta, et edukas väljasuremismälu on seotud ventraalse hipokampusega.See on iseloomulik "vahepealsetele" vHPC-dele, kuna sama mustrit ei täheldatud tagumises piirkonnas.Kooskõlas varasema tööga ei leidnud me aferentsetes vHPC IL-des Fos-i aktiveerimises muutusi.On olulisi tõendeid selle kohta, et vHPC28,60,61 on vajalik hirmu realiseerimiseks, kui CS toimub väljaspool tuhmumise konteksti, ja et see sõltub vähemalt osaliselt vHPC sisenemisest IL13-sse.Nende varasemate tulemuste põhjal eeldame, et halb pleekimine on seotud vHPC suurenenud prognoositava IL-aktiivsusega.See aga nii ei olnud, kuna IL-ga projitseeritud retrograadselt märgistatud vHPC-des ega märgistamata rakkudes vHPC-des ei olnud erinevusi Fos-i aktiivsuses.See viitab sellele, et suutmatus tuhmumise kontekstis hääbumist meeles pidada võib vallandada teistsuguse mehhanismi kui uuenemishirm.
Oluline on märkida mõningaid disaini- ja analüüsipiiranguid ning seda, kuidas need meie järeldusi mõjutavad.Esiteks jagasime loomad ülemisse ja alumisse kolmandikku ning hiired "headeks" ja "halbadeks" väljasuremise meeldetuletuse skooride alusel.Seda tehakse selleks, et vältida rühmaskeeme, mis jagavad loomad jaotuse keskelt eraldi rühmadesse, või rühmaskeeme, mis jätavad loomad jaotuse keskelt välja, näiteks eraldamist mediaani järgi või rottide ülemise ja alumise kolmandiku võrdlemist. .me tahame seda olukorda vältida, sest mediaanjaotus ei kajasta inimeste traumareaktsioonide varieeruvust, mida proovime modelleerida.Lisaks, kuigi rottide ülemise ja alumise kolmandiku võrdlemine võimaldab meil võrrelda sarnase suurusega rühmi, eirab see lähenemisviis jaotuskeskmes olevaid loomi ega kajasta täpselt vigastuste reaktsioonide varieeruvust.Kuigi meie meetodil võib esineda probleeme heterogeense dispersiooni ja ebavõrdse valimi suurusega rühmade võrdlemisega, tabab see seda, mida me püüame jäljendada, paremini kui alternatiivsed meetodid.
Siin esitatud tulemused aitavad meil paremini mõista, kuidas väljasuremise meeldetuletamise individuaalsed erinevused kajastuvad närviahela aktiivsuse erinevustes.Meie leiud võivad olla asjakohased traumajärgse stressihäire puhul, mis on teadaolevalt seotud liigse hirmu ja võimetusega hirmureaktsioone kõrvaldada.Näitame, et väljasuremise tagasikutsumise erinevused on seotud IL-le projitseeritud sisemise ja välise närvitegevuse erinevustega.Need erinevused jaotati erinevate piirkondade vahel piki anteroposterioorset telge, rõhutades veelgi ajufunktsiooni hindamise tähtsust alampiirkonna tasandil.Praeguse meetodi puudused hõlmavad uuringu asjakohasust ja keskendumist isasnärilistele.Tulevased uuringud peaksid määrama kindlaks neurobioloogilised mehhanismid, mis on emaste näriliste väljasuremise õppimise aluseks, ja kasutama meetodeid põhjuslike järelduste tegemiseks.
Käesolevas uuringus kasutatud ja/või analüüsitud andmekogumid on mõistliku taotluse korral kättesaadavad vastavatelt autoritelt.
Pavlov IP konditsioneerimine: ajukoore füsioloogilise aktiivsuse uuring.(Oxford University Press, 1927).
Rothbaum, BO, & Davis, M. Õppimispõhimõtete rakendamine traumajärgsete reaktsioonide ravis. Rothbaum, BO, & Davis, M. Õppimispõhimõtete rakendamine traumajärgsete reaktsioonide ravis.Rotbaum BO ja Davis M. Õppimispõhimõtete rakendamine traumajärgsete reaktsioonide ravis.Rotbaum BO ja Davis M. Õppimispõhimõtete rakendamine traumajärgsete reaktsioonide ravis.installida.New Yorgi kolledž.teadus.1008(1), 112-121 (2003).
Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Ülevaade kokkupuuteteraapiast: PTSD ravi kuldstandard. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Ülevaade kokkupuuteteraapiast: PTSD ravi kuldstandard.Rauch SA, Eftekhari A. ja Ruzek DI Ülevaade kokkupuuteteraapiast: posttraumaatilise stressihäire kuldstandardravi. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI 暴露疗法回顾: PTSD 治疗的黄金标准. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Kokkupuuteteraapia ülevaade: PTSD ravi kuldstandard.Rauch, SA, Eftekhari, A. ja Ruzek, DI Ülevaade kokkupuuteteraapiast: posttraumaatilise stressihäire kuldstandardravi.J. Taastusravi.veehoidla arendus 49, 679–687.https://doi.org/10.1682/jrrd.2011.08.0152 (2012).
Foa, EB Pika kokkupuute teraapia: minevik, olevik ja tulevik.Ärevuse mahasurumine 28, 1043–1047.https://doi.org/10.1002/da.20907 (2011).
Hr Millard et al.Posttraumaatilise stressihäire mälukaotuse eksistentsiaalsed ja omandatud põhjused: kaksikuuringu tulemused.J. Psühhiaater.mahuti.42(7), 515-520 (2008).
Hr Millard et al.Neurobioloogiline alus võimetus meenutada tuhmuvaid mälestusi posttraumaatilise stressihäire korral.bioloogia.Psühholoogia.66(12), 1075-1082 (2009).
Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Individuaalsed erinevused hirmus: hirmureaktiivsuse ja hirmu taastumise fenotüüpide eraldamine. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Individuaalsed erinevused hirmus: hirmureaktiivsuse ja hirmu taastumise fenotüüpide eraldamine.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. ja LeDoux, JE Individuaalsed erinevused hirmus: hirmu reaktiivsuse ja hirmu taastamise fenotüüpide eristamine. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE 恐惧的个体差异：隔离恐惧反应和恐惧恢复表型. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Individuaalsed erinevused hirmus: hirmureaktsiooni isoleerimine ja hirmu taastumise tabel.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. ja LeDoux, JE Individuaalsed erinevused hirmus: hirmureaktsioonide isoleerimine ja hirmu taastumise fenotüüp.J. Trauma.surve 20(4), 413–422 (2007).
Russo, AS & Parsons, RG Akustiline ehmatusreaktsioon rottidel ennustab hirmu väljasuremise üksikisikutevahelisi erinevusi. Russo, AS & Parsons, RG Akustiline ehmatusreaktsioon rottidel ennustab hirmu väljasuremise üksikisikutevahelisi erinevusi.Russo, AS ja Parsons, RG Akustiline ehmatusreaktsioon rottidel ennustab individuaalseid erinevusi hirmu väljasuremises. Russo, AS & Parsons, RG 大鼠的声学惊吓反应预测恐惧消退的个体差异. Russo, AS & Parsons, RGRusso, AS ja Parsons, RG Akustiline ehmatusreaktsioon rottidel ennustab individuaalseid erinevusi hirmu väljasuremises.Neurobioloogia.Uuring.Mälu.139, 157–164 (2017).
Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Individuaalne varieeruvus hirmu väljasuremise meenutamisel on seotud mitogeen-aktiveeritud proteiinkinaasi fosforüülimisega infralimbilises ajukoores. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Individuaalne varieeruvus hirmu väljasuremise meenutamisel on seotud mitogeen-aktiveeritud proteiinkinaasi fosforüülimisega infralimbilises ajukoores.Russo, AS, Lee, J. ja Parsons, RG Hirmu meenutamise väljasuremise individuaalne varieeruvus on seotud mitogeen-aktiveeritud proteiinkinaasi fosforüülimisega infralimbilises ajukoores. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG 回忆恐惧消退的个体差异与边缘下皮质中丝裂原活化蛋白激活化蛋白激 Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Hirmu tuhmumise mäletamine on seotud perifeerse 美裯中丝裂原活化筒能激酶的fosforiseerimise individuaalsete erinevustega.Russo, AS, Lee, J. ja Parsons, RG Individuaalsed erinevused hirmu väljasuremises tagasikutsumise ajal on seotud mitogeen-aktiveeritud proteiinkinaaside fosforüülimisega alajäseme ajukoores.Psychopharmacology 236(7), 2039–2048 (2019).